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Plonger un écouvillon dans cette suspension et éliminer l'excès de liquide en tournant et pressant l'écouvillon contre la partie haute de la paroi du tube (la pression exercée est plus forte sur la partie haute sinon la tige de l'écouvillon se plie). Ensemencer, en stries serrées, avec l'écouvillon, la totalité de la surface du milieu dans trois directions (faire tourner la boite d'1/3 de tour entre chaque passage). Déposer les disques avec un distributeur ou bien à la pince en s'assurant qu'ils sont bien plaqués contre la gélose. Gélose au cétrimide. Incuber en respectant les préconisations du CA-SFM/EUCAST: température, atmosphère et durée. Mesurer les diamètres d'inhibition autour des disques et les comparer aux diamètres critiques fixés par le CA-SFM/EUCAST afin de déterminer la catégorie clinique: S: sensible à dose standard SFE: sensible à forte exposition à l'antibiotique R: résistant Il faut également respecter certains délais: utiliser la suspension dans les 15 minutes qui suivent sa préparation et jamais au delà d'une heure.
La gélose est une substance nutritive favorisant ou inhibant ( selon sa composition) la prolifération et le développement des bactéries. Il s'agit donc du milieu de culture des bactéries. Elle est utilisée dans les laboratoires pour déterminer le niveau d'efficacité de nouveaux antibiotiques, tester la résistance bactérienne vis-à-vis de produits déjà connus, ou plus simplement, pour isoler ou cultiver des bactéries. La gélose se différencie du bouillon, la plupart du temps de bouillon de bœuf, par sa solidité due, dans sa composition, à la présence d' agar-agar à hauteur de 20 g/L environ. Types de géloses [ modifier | modifier le code] Selon son contenu, une gélose peut favoriser la croissance de certaines bactéries aux dépens des autres; c'est ce qu'on appelle la sélectivité. De plus, certaines géloses sont différentielles, c'est-à-dire que l'aspect des colonies bactériennes qui s'y forment peut permettre, jusqu'à un certain point, de déduire de quel type de bactérie il s'agit. Voici quelques géloses courantes dans les laboratoires de microbiologie.
Concernant la stabilité des réactifs après ouverture, le laboratoire a suivi les recommandations fournisseurs. Les réactifs ont été stockés et utilisés dans le cadre des délais de péremptions en respectant les préconisations du fournisseur (Bruker®) [19]. 8) Comparaison de méthodes La comparaison de méthodes a été réalisée en comparant l'identification par spectrométrie de masse MALDI-TOF avec l'identification par séquençage de fragment de l'ADNr 16S et du gène rpoD en tant que méthode de référence. Pour cela, une collection de souches environnementales et cliniques a été utilisée. L'objectif était de vérifier la corrélation entre les deux méthodes.