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et les Shigella sp. La sélectivité de ce milieu est basée sur la présence de sels biliaires, de bleu de bromothymol.... TSI La gélose TSI est utilisée pour l'identification présomptive des entérobactéries basée sur la fermentation du glucose, du lactose, du saccharose et sur la production de gaz et d' Triple Sugar Iron Agar contient trois glucides (glucose, lactose et saccharose)... M. E. V. A. G Ce milieu permet de déterminer la voie d'attaque du glucose utilisé comme source d'énergie par la plupart des bactéries. Pour synthétiser de l'énergie, les bactéries peuvent attaquer par.... Citrate de Simmons La gélose Simmons citrate (milieu minéral minimum au citrate de sodium) est utilisé pour la différenciation des bacilles Gram négatifs.
Résumé du document Le métabolisme glucidique correspond à l'ensemble des réactions, qui font intervenir les glucides en tant que substrats. Un glucide est une molécule organique composée d'atomes de C, H et O. Il comporte une fonction aldéhyde ou une fonction cétone. Il existe plusieurs sortes de glucides (... ) Sommaire I) Qu'est-ce qu'un glucide? II) Métabolisme des glucides: mise en évidence de l'utilisation des glucides III) Voie d'attaque des glucides A. Définitions B. Milieux d'étude de la voie d'attaque des glucides: les MEVAG IV) Mise en évidence de l'utilisation d'un glucide par acidification A. Principe de l'étude B. Exemples de milieux C. Milieu de base liquide: eau peptonée + glucide + indicateur de pH D. Milieux solides: milieux d'isolement E. Milieux complexes V) Etude de la fermentation d'un glucide VI) Autres tests de mise en évidence d'un glucide A. Mise en évidence de la disparition d'un polyholoside B. Mise en évidence de l'apparition d'un produit: l'esculétine C. Mise en évidence de la présence d'enzyme intervenant dans le métabolisme glucidique Extraits [... ] Le métabolisme glucidique Qu'est-ce qu'un glucide?
Cette technique permet la détermination du métabolisme oxydation ou fermentatif de la bactérie, autrement dit: dégrade-t-elle le glucose via le cycle de Krebs ou utilise-t-elle une autre voie? Principe Dans le milieu Hugh et Leifson auquel on ajoute du glucose, on cherche le métabolisme de la bactérie. Le milieu est régénéré (il a été maintenu en surfusion pour que les gaz dissous dans le milieu s'en échappent). Il possède donc un gradient de concentration en dioxygène (l'O 2 est plus abondant en surface qu'en profondeur). Les bactéries qui utilisent le glucose produisent des acides. La visualisation des productions d'acide est indiquée par le changement de couleur du bleu de bromothymol, indicateur coloré de pH contenu dans le milieu. À la fin de l'incubation, on observe le changement de couleur du milieu pour déterminer le type oxydatif ou fermentatif. Composition du milieu de Hugh et Leifson:→voir Hugh et Leifson Attention: c'est après la régénération qu'il faut ajouter une solution de glucose à 10%.
β-galactosidase Lactose glucose + galactose La recherche de cette enzyme ne se fait qu'à partir d'un milieu lactosé (exemple: milieu Kligler-Hajna). En effet, l'enzyme n'est synthétisée qu'en présence de lactose dans le milieu (enzyme inductible). La recherche ne présente d'intérêt que dans le cas de bactéries lactose En effet, toutes les bactéries lactose+ sont β-galactosidase la recherche de l'enzyme est donc inutile. On utilise pour sa recherche un substrat synthétique, l'ONPG ortho-nitro-phénylgalactoside). VI-4- Mise en évidence de l'assimilation d'un substrat carboné Exemple: milieu Citrate de Simmons. ] Cette recherche s'effectue à partir du milieu Clark et Lubs. VI- Autres tests de mise en évidence d'un glucide VI-1- Mise en évidence de la disparition d'un polyholoside Exemple: la dégradation de l'amidon est recherchée sur milieu gélosé à l'amidon. L'attaque de l'amidon est mise en évidence par la disparition de la coloration caractéristique dans la gélose. VI-2- Mise en évidence de l'apparition d'un produit: l'esculétine L'esculine est un hétéroside qui par hydrolyse libère du glucose utilisé par les bactéries et de l'esculétine qui donne un précipité noie en présence de fer. ]
Autrement, elle pourrait se caraméliser. Technique On utilise une culture pure pour ne pas avoir de résultats faussés. On utilise deux milieux coulés en tube: la surface du premier est exposée à l'air (Tube O) tandis que l'autre est isolé de l'air avec de la paraffine liquide (Tube F). Régénération à 100 °C pendant 30 minutes. On ajoute la solution de glucose à 10% dans les tubes contenant la gélose surfusion (10 gouttes environ) à l'aide d'une pipette pasteur. Laisser refroidir le milieu jusqu'à ce qu'il se durcisse (à mettre sous un robinet d'eau froide pour gagner du temps par exemple). On ensemence les tubes avec une pipette pasteur boutonnée ou avec une anse. On ajoute de la paraffine dans le tube F, sur une hauteur de 1 cm environ. Incubation à 37 °C pendant 24 à 48 h. Lecture Résultats possibles ( O: Ouvert - F: Fermé) 1 Tubes tel qu'ils doivent être après ensemencement 2 Haut du Tube O jaune → il y a eu un changement de couleur dû à l'acidification dans le haut du tube O uniquement: les bactéries ont besoin d'oxygène pour dégrader le glucose.
Rappel: vérifier le milieux de culture utilisé et la température d'incubation 3. Réalisation du test de discrimination rapide Seul le test de la recherche de l'oxydase est réalisé. Justifier ce choix au vu des caractères déjà recueillis. Indiquer, pour chaque souche testée, sous forme de tableau: observation / interprétation / conclusion. 4.
Les bactéries sont oxydatives. 3 Tubes O et F entièrement jaunes → il y a eu virage de l'indicateur coloré à cause de la production d'acide dans tout le tube: les bactéries ont utilisé le glucose en présence et en absence d'oxygène. Les bactéries sont donc fermentatives. 4 Haut du tube O bleu → bactéries inertes au glucose: utilisation des peptides comme source d'énergie. Précisions Le type oxydatif ou fermentatif est étroitement lié avec le type respiratoire de la bactérie. On peut donc vérifier la cohérence des résultats avec le milieu viande-foie. Voir aussi Recherche du type respiratoire Portail de la biologie